
厭氧培養(yǎng)箱是用于培養(yǎng)厭氧微生物的關鍵設備,通過創(chuàng)造無氧環(huán)境確保微生物正常生長。以下是其使用須知,涵蓋操作規(guī)范、安全事項及維護要點:
一、操作前準備
1. 環(huán)境檢查
確保培養(yǎng)箱放置于通風、干燥、無腐蝕性氣體的環(huán)境中,遠離火源和高溫。
檢查電源、氣源(如氮氣、氫氣、二氧化碳混合氣)連接是否穩(wěn)定,氣體壓力需符合設備要求。
2. 氣密性檢測
使用前需測試箱體密封性(如關閉艙門后抽真空,觀察壓力是否穩(wěn)定),防止氧氣滲入。
3. 耗材準備
提前放入預還原培養(yǎng)基、厭氧指示劑(如刃天青,無色表示無氧)、無菌手套等。
二、操作流程
1. 過渡艙使用
物品需通過過渡艙進出,遵循“抽真空 充惰性氣體"循環(huán)(通常2 3次)以去除氧氣。
避免頻繁開啟主艙門,防止氧氣進入。
2. 培養(yǎng)條件設置
根據菌種需求調節(jié)溫度(通常30 37℃)和氣體比例(如85% N?、10% H?、5% CO?)。
使用鈀催化劑(常溫或加熱)去除殘留氧氣,需定期活化(160℃烘烤2小時)。
3. 樣本操作
操作時佩戴無菌手套,避免污染??焖俎D移樣本,減少暴露時間。
三、安全注意事項
1. 氣體安全
氫氣易燃易爆,確保氣路無泄漏,遠離明火。建議安裝氫氣檢測報警器。
更換氣瓶時需關閉總閥,排空殘余氣體。
2. 生物安全
處理病原菌時,需在箱內完成消毒(如紫外照射或消毒劑擦拭),廢棄物經高壓滅菌后處理。
3. 應急處理
突發(fā)停電時,立即關閉氣閥,避免氣體異?;旌??;謴凸╇姾笾匦滦虱h(huán)境。
四、日常維護
1. 清潔與消毒
定期用75%酒精或專用消毒劑擦拭內壁、手套等,防止污染。
過渡艙使用后及時清理殘留物。
2. 催化劑與指示劑更換
鈀催化劑每3 6個月或失效時更換(顏色變深提示失效)。
厭氧指示劑每次培養(yǎng)前檢查,確保有效性。
3. 系統(tǒng)校準
定期校驗溫度傳感器、氣體流量計及氧濃度監(jiān)測儀(如配備)。
五、常見問題處理
氧氣殘留:檢查密封條是否老化,催化劑是否失效,必要時延長過渡艙排氣時間。
濕度異常:箱內放置干燥劑或調節(jié)氣體濕度(部分型號支持)。
污染跡象:消毒培養(yǎng)箱,檢查滅菌物品操作流程。
六、長期停用
清空培養(yǎng)物,清潔箱體,釋放艙內壓力,關閉氣源并斷電。定期通電維護電路系統(tǒng)。
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